D-Sorbitol/Xylitol

Til bestemmelse af D-sorbitol og xylitol i levnedsmidler, så som bageringredienser, chokolade, diætkost, frugtprodukter, sodavand, slik, tyggegummi, medicin og kosmetik, papir og pap og til biologiske prøver.

D-sorbitol er en sukkeralkohol. I Naturen reduceres D-fructose i vid udstrækning til D-sorbitol, dette sker fx i en lang række frugter; æbler, kirsebær, pærer, og blommer. D-sorbitol findes ikke i vindruer, vindruejuice og vine. Sorbitol har E nummer; E-nr. 420 og bruges i levnedsmidler som stabilisator og som sødestof. Forekommer naturligt, men fremstilles ved kemisk behandling af stivelse. Sorbitol er meget brugt i diabetiske produkter, hvor sorbitol erstatter D-glucose, da sorbitol metaboliseringen ikke er reguleret af insulin.

Xylitol er en naturligt forekommende sukkeralkohol som ligeledes forefindes i en lang række frugter. Xylitol har E nummer E-nr. 967 og hører under sødestoffer som hovedsageligt bliver brugt i industrien. Bruges i stedet for sukker. Xylitol adskiller sig fra de egentlige kunstige/syntetiske sødestoffer ved at være nært beslægtet med sukker i kemisk henseende. Produktet indeholder 2.4 kalorier pr. gram. Fremstilles ved kemisk behandling af træsukker.

Enzymreaktionerne:

D-sorbitol og xylitol koncentration i prøven bestemmes vha. af 2 successive enzymrektioner.

I den første reaktion oxideres D-sorbitol og xylitol med enzymet sorbítol dehydrogenase (SD)

1) D-sorbitol + xylitol + NAD+ ↔ D-fructose + D-xylulose + NADH

Reaktion 1) er ufuldstændig og ligevægten forskydes mod syntesen af D-fructose + D-xylulose ved at lade NADH indgå i en irreversibel enzym reaktion med iodonitrotetrazolium (INT)

2) NADH + INT → NAD+ + formazan , reaktion 2 katalyseres af enzymet diaphorase

Mængden af den chromogene komponent formazan er støkiometrisk ækvivalent til mængden af D-sorbitol + xylitol i prøven.

Niveauet af formazan dannet i enzymreaktion 2 bestemmes spektrofotometrisk ved at måle lysabsorbansen ved 492 nm.

Detektionsniveauet er på 0,2 mg/l - 0,1 g/l