D-Glucose/D-Fructose

Til enzymatisk bestemmelse af D-glucose + D-fructose i levnedsmidler, så som bageringredienser, alkoholiske drikkevarer, brød, salt og krydderier, pølser, kosmetik, farmecia, papir, tobak og biologiske prøver.

D-glucose er en essentiel komponent i kulstofomsætningen. D-glucose forefindes som regel i kombination med D-fructose og Sucrose. Bestemmelser af D-glucose er vigtig i biokemien, klinisk kemi og i fødevareindustrien. Som regel bestemmes koncentrationen af D-glucose i kombination med andre karbonhydrater. D-Fructose findes hovedsageligt i planter, hvor det udgør en vigtig komponent i fx frugt. D-fructose er en komponent af mange di, tri og oligosaccharider og ikke mindst en vigtig komponent af polysaccheridet inulin.

I levnedmiddelanalyser er man ikke kun interesseret i summen af D-glucose og D-fructose, men også forholdet mellem disse.

Målemetoden er specifik for D-glucose og D-Fructose og kan bruges til at bestemme både summen af de to sukre men også forholdet imellem dem: (1) Under tilstedeværelsen af co-faktoren ATP og enzymet Hexokinase omdannes D-glucose til glucose-6-P,samtidig omdannes D-fructose til fructose-6-P. (2) Glucose-6-P omdannes under tilstedeværelsen af enzymet glucose-6-fosfat dehydrogennase og NADP+ til D-gluconate-6-fosfat.(3) Fructose-6-P katalyseres ikke af enzymet glucose-6-fosfat dehydrogennase før det vha. isomerasen PGI omdannes til glucose-6-P, som via reaktion(2) videre omdannes til D-gluconate-6-fosfat.

Under reaktion(2) reduceres NADP+ til NADPH. Mængden af NADPH er støkiometrisk ækvivalent til mængden af D-glucose (+ D-Frucotose under forudsætning at prøven også er behandlet med PGI) i prøven.

Niveauet af NADPH i enzymreaktionen bestemmes spektrofotometrisk ved at måle lysabsorbansen ved 334, 340 eller 365 nm.

Detektionsniveauet er på 0,4 mg/l - 1 gram/l