Lactose/D-Glucose

Til bestemmelse af laktose og D-glucose i levnedsmidler, så som mælk og mejeriprodukter, mælk og vallepulver, forarbejdet ost, surmælk. I levnedsmidler som indeholder mælk og mælkeprodukter, bagemidler, kødprodukter, dyrefoder, kosmetik, medicin og biologiske prøver.

Laktose er kemisk set et disaccharid, bestående af de to sukkermolekyler/saccharider; D-glucose og D-galactose.

Mælkesukker (laktose) er den vigtigstesukkertype, der findes i mælk. Mælkesukker har derfor stor næringsværdi. Laktose er uopløselig i koldt vand og kan derfor let isoleres fra fx valle. Laktose indholdet bestemmes i levnedsmidler,der indeholder eller kan indeholde mælk. Der skal stå på produktet at det indeholder mælk. Mennesker med laktoseintolerans bør undgå levnedsmidler med mælk.

Mælkesukker-intolerans (laktoseintolerans) er en tilstand, hvor man får diaré, fordi man ikke kan optage mælkesukker fra mave- tarmkanalen. Mælkesukker vil derfor gære i tarmen og forårsage mavesmerter, diaré og oppustethed. Det meste af Nordeuropas og Nordamerikas voksne befolkning har bevaret evnen til at optage mælkesukker, men hovedparten af jordens voksne befolkning har rent faktisk mælkesukker-intolerans. Personer med store tarmoperationer, mavesæksoperationer eller tyndtarmssygdom (cøliaki) har ofte laktoseintolerans.

D-glucose er en bestandel af invertsukker og stivelsessukker. Begge dele anvendes tilfremstiling af levnedsmidler.

Enzymreaktionen:

Under tilstedeværelsen af enzymet β-galactosidase hydrolyseres laktose til D-glucose og galaktose. D-Glucosen fra denne enzymreaktion oxideres under tilstedeværelsen af co-faktorene ATP og NADP+ samt enzymerne hexokinase (HK) og glucose-6fosfat dehydrogenase(G6P-DH) til D-gluconat-6-fosfat.

Under enzymreaktionen reduceres NADP+ til NADPH. Mængden af NADPH er støkiometrisk ækvivalent til mængden af enten laktose + D-glukose eller D-glucose i prøven.

Niveauet af NADPH i enzymreaktionen bestemmes spektrofotometrisk ved at måle lysabsorbansen ved 334, 340 eller 365 nm.

Detektionsniveauet for laktose + D-glucose er på 7 mg/l - 2 gram/l

Detektionsgrænse for D-glucose er på 4 mg/l