Maltose/Sucrose/D-Glucose

Til bestemmelse af maltose, sukrose og D glukose i levnedsmidler, så som babymad, øl, brød og bagervarer, chokolade, flydende sukker og prøver der indeholder flydende sukker og biologiske prøver.

Maltose dannes i stivelse og i frø og malt ved enzymatisk hydrolyse (amylase). Glukose sirup, består af glukose og maltose ("stivelsessukker") udvindes fra stivelse ved enzymatisk behandling med enzymet amyloglucosidase.

Sucrose spiller en stor rolle i planters metabolisme. Udvindingen af sucrose fra sukkerrør og roer er økonomisk fordelagtigt. Sucrose hydrolyseres til/inverteres til D-glucose + D-fructose. Sucrose er en vigtig ingrediens i mange fødevarer.

D-glucose er en essentiel komponent i kulstofomsætningen. Bestemmelser af D-glucose er vigtig i biokemien, klinisk kemi og i fødevareindustrien. Som regel bestemmes koncentrationen af D-glucose i kombination med andre karbonhydrater, som regel maltose og sucrose.

Enzymreaktionerne:

Maltose hydrolyseres fuldstændigt med α-glucosidase til D-glucose. Disaccharidet maltose hydrolyseres til 2 molekyler D-glucose.

Sucrose hydrolyseres/inverteres med β-fructosidase (invertase) til D-glucose

Slutteligt omdannes D-glucose under tilstedeværelsen af co-faktorene ATP og NADP+ samt enzymerne hexokinase glucose-6-phosphate til D-gluconate-6-P

Under den sidste reaktion reduceres NADP+ til NADPH. Mængden af NADPH er støkiometrisk ækvivalent til den mængden af D-glucose + ½ x maltose + sucrose i prøven.

Niveauet af NADPH i enzymreaktionen bestemmes spektrofotometrisk ved at måle lysabsorbansen ved 334, 340 eller 365 nm.

Detektionsniveauet for D-glucose er på 0,4 mg/l - 1 gram/l

Detektionsniveauet for D-glucose +maltose + sucrose er 2mg/l - 1 gram/l