Raffinose

Til bestemmelse af raffinose og D-galaktose i raffinerede sukkerprodukter, i sojabønner og til biologiske prøver.

Andre navne: O--D-galactopyranosyl-(1->6)--D-glucopyranosyl--D-fructofuranosid, melitose, melitriose

Raffinose er en trisaccharid, også kaldt melitose, og som er sammensat af galaktose, glukose og fruktose. Den forekommer frit i sojabønner og i sukkerroer i store mængder. Ofte ses en stigning af raffinoseindholdet om efteråret hos planter der overvintrer.

Raffinose tages ikke op i kroppen, men bakterierne i tyktarmen nedbryder delvis raffinose, hvilket resulterer i gasser ved stor konsumering af sojabønner og andre ærteplanter.

Raffinose forårsager problemer under saccharosetilvirkningen/sukkerproduktionen, hvor raffinose akkumuleres i molassen, hvor den forstyrrer både krystalliseringen af sucrose og saccharoseanalyserne.

Tilstedeværelsen af Raffinose er også en indirekte indikation for produktforfalskning, ved fx ulovlig tilsætning af sojabønner.

Enzymreaktionerne:

Raffinose hydrolyseres først med enzymet α-galactosidase, hvorved der dannes D-galactose + sucrose. D-galactosen oxideres dernæst under tilstedeværelsen af co-faktoren NAD+ og enzymet galactose dehydrogenase til D-galatonic acid

Under den sidste enzymreaktion reduceres NAD+ til NADH. Mængden af dannet NADH er støkiometrisk ækvivalent til mængden af Raffinose + galaktose i prøven.

Niveauet af NADH i enzymreaktionen bestemmes spektrofotometrisk ved at måle lysabsorbansen ved 334, 340 eller 365 nm.

Detektionsniveauet for Raffinose + D-galaktose er på 5 mg/l - 2,5 g/l

Detektionsgrænsen for D-galaktose er 2 mg/l